一、细胞基本属性
- 细胞名称：鸭胚胎成纤维细胞（Duck Embryonic Fibroblasts）
- 细胞别称：DEF；胚胎成纤维细胞；鸭胚成纤维细胞
- 种属来源：鸭（Anas platyrhynchos）
- 胚胎日龄：健康鸭胚胎（9 - 11日龄，无菌条件下获取）
- 组织来源：鸭胚胎真皮层或结缔组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞贴壁基质）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤状，单层贴壁呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P6（维持遗传稳定性与增殖活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10%胎牛血清+1%非必需氨基酸+2mM L - 谷氨酰胺）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 36小时（依赖血清浓度与接种密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落
- 注意事项
- 避免消化过度（成纤维细胞易聚集成团）
- 传代后12小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵-1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 梯度降温：4℃ 30min→ - 20℃ 2h→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后12小时贴壁率检测（正常贴壁率≥85%）
- 功能验证：细胞增殖曲线测定（P3代细胞应保持稳定增殖速率）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测图像）
- 复苏后贴壁率低于80%（需提供显微镜观察记录）
- 种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 未按推荐条件保存或复苏（如室温放置超1小时）
- 使用非标准培养基导致细胞形态异常
- 反复冻融或不当操作导致细胞损伤
- 未按要求进行污染筛查直接用于实验
