一、细胞基本属性
1. 细胞名称:鸡真皮成纤维细胞(Chicken Dermal Fibroblasts)
2. 细胞别称:CDF;鸡皮肤成纤维细胞;鸡DF细胞
3. 种属来源:鸡(Gallus gallus)
4. 年龄性别:健康鸡只(性别不限,供体筛选无皮肤病或感染史)
5. 组织来源:真皮层组织
6. 生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
7. 细胞形态:典型长梭形或星形,单层贴壁后呈放射状排列
8. 细胞代数:P3 - P8(确保细胞活性和功能稳定性)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
13. 倍增时间:约24 - 48小时(与培养基成分及接种密度相关)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热培养基离心后重悬接种。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于培养箱中平衡2小时。
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)。
3. 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度为3×10³ cells/cm²)。
4. 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化。
5. 注意事项:避免消化过度导致细胞膜损伤;传代后12小时内更换新鲜培养基以去除残留酶。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
3. 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
4. 复苏验证:复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥95%);功能验证采用细胞增殖实验或波形蛋白(Vimentin)免疫荧光检测。
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 1.运输过程中干冰耗尽或温度异常导致细胞死亡(需提供物流记录及包装照片)。
- 2.3日内经PCR证实支原体或细菌污染。
- 3.复苏后细胞存活率低于90%(需提供台盼蓝染色结果)。
- 4.物种鉴定结果与描述不符。
2. 不予重发情形
- 1.客户未在72小时内完成细胞复苏操作。
- 2.使用非推荐培养基或自行修改培养条件导致细胞状态异常。
- 3.因反复冻融或操作失误引起的细胞损伤。
- 4.未按规范进行支原体检测直接用于实验。