一、细胞基本属性
细胞名称
犬脐静脉内皮细胞(Canine Umbilical Vein Endothelial Cells)
细胞别称
CUVEC;脐静脉内皮细胞;静脉内皮细胞
种属来源
犬(Canis lupus familiaris)
年龄性别
健康新生犬(性别不限,供体筛选无先天性疾病史)
组织来源
脐静脉血管段
生长特性
贴壁生长(依赖胶原蛋白或明胶包被培养器皿)
细胞形态
典型单层铺路石状,融合后呈梭形或多角形
细胞代数
P3 - P8(确保功能稳定性和遗传一致性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Endothelial Cell Medium(含2% FBS+内皮细胞生长因子及肝素)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时(依赖接种密度及培养条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
• 培养瓶:酒精擦拭表面,静置培养箱1小时恢复气体平衡
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
传代比例
1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法
• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
• 37℃消化30 - 60秒,轻柔吹打至细胞完全脱落
注意事项
• 消化后需立即加入含血清培养基终止反应
• 首次换液建议在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤
• 离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
• 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮长期保存
复苏验证
• 复苏后12小时检测细胞活性(台盼蓝染色存活率≥90%)
• 功能验证:Ⅷ因子免疫荧光染色确认内皮特性
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供检测结果)
3. 细胞复苏存活率低于90%(经第三方检测确认)
4. 细胞种属鉴定结果不符
不予重发情形
1. 客户未按规范进行细胞复苏或培养操作
2. 使用非指定培养基或试剂导致功能异常
3. 未在推荐代数范围内使用细胞(超过P8代)
4. 未留存冻存备份导致细胞损失
(以上内容基于标准操作流程,具体实验条件需根据实验室环境优化调整。)