一、细胞基本属性
- 细胞名称：鸡气管上皮细胞（Chicken Tracheal Epithelial Cells）
- 细胞别称：CTE细胞；气管黏膜上皮细胞
- 种属来源：鸡（Gallus gallus domesticus）
- 年龄性别：健康成年鸡（性别不限，供体无呼吸道感染史）
- 组织来源：气管黏膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原包被培养器皿）
- 细胞形态：铺路石状单层排列，细胞间连接紧密
- 细胞代数：P2 - P6（维持纤毛分化与屏障功能）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：气液界面分化培养基（含2%胎牛血清及上皮生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：39℃（适配禽类体温）；湿度：95%
- 冻存条件：无血清禽类专用冻存液（含8% DMSO及糖原保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（受气液界面培养阶段影响）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体接种或疫苗开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时，待细胞贴壁后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 85%（纤毛分化阶段需延长培养周期）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项
- 避免频繁换液以防止纤毛结构脱落
- 气液界面培养阶段需严格控制培养基液面高度
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：禽类专用无血清冻存液（含8% DMSO+海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮储存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：透射电镜观察纤毛结构完整性（P3代细胞应保有纤毛发生能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中液氮罐失压导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实支原体污染（需提供荧光定量PCR结果）
- 复苏后存活率低于承诺值（需提供染色检测视频）
- 物种鉴定结果与描述不符（需提供STR比对报告）
- 不予重发情形
- 未按气液界面培养规范导致细胞分化失败
- 使用哺乳动物培养基导致细胞代谢异常
- 未定期检测纤毛功能而误判细胞状态
- 未按要求预包被胶原即进行传代操作
（注：所有操作需遵守生物安全规范，培养废弃物需经高压灭菌处理。）
