一、细胞基本属性
- 细胞名称：犬肠微血管内皮细胞（Canine Intestinal Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：CIMVEC；肠微血管内皮细胞；肠道内皮细胞
- 种属来源：犬（Canis lupus familiaris）
- 年龄性别：健康成年犬（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：肠道组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：典型“铺路石样”单层，接触抑制后呈多角形
- 细胞代数：P3 - P8（保证功能稳定性与遗传一致性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：犬内皮细胞专用培养基（含2% FBS +内皮细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（依赖培养密度与基质条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入4mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时平衡温湿度
- 传代标准：细胞融合度达85% - 90%（常规每3 - 4天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度5×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.05% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化
- 注意事项：
- 避免消化过度（防止细胞间连接蛋白损伤）
- 传代后24小时内更换培养基以清除残留消化酶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 转移至液氮
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥95%）
- 功能验证：跨膜电阻值检测（P5代细胞应维持屏障完整性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供干冰包装状态证明）
- 3日内证实支原体或细菌污染（需提交PCR检测报告）
- 复苏后细胞活力低于90%（台盼蓝染色法）
- 物种特异性PCR鉴定与描述不符
- 不予重发情形：
- 客户延迟复苏超过72小时
- 使用非指定培养基导致细胞状态异常
- 反复冻融操作造成细胞损伤
- 未按规范检测支原体直接开展实验
