一、细胞基本属性
1. 细胞名称:狗皮下微血管内皮细胞(Canine Subcutaneous Microvascular Endothelial Cells)
2. 细胞别称:CSMEC;皮下微血管内皮细胞;皮下血管内皮细胞
3. 种属来源:犬(Canis lupus familiaris)
4. 年龄性别:健康成年犬(性别不限,供体筛选无皮下组织疾病史)
5. 组织来源:皮下组织微血管段
6. 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形
8. 细胞代数:P3 - P8(维持功能稳定性与低传代变异风险)
9. 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS + 血管内皮生长因子及肝素)
11. 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及冷冻保护剂),液氮气相长期保存
13. 倍增时间:约48 - 72小时(依培养密度及基质条件波动)
14. 供应限制:仅限基础研究使用,不可用于药物开发或体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻后,加入预热培养基离心洗涤;培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡。
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代一次)。
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)。
4. 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化1 - 2分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即用含血清培养基终止。
5. 注意事项:避免消化过度导致细胞膜损伤;传代后12小时内更换新鲜培养基以清除残余酶类。
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
3. 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,分装至冻存管,程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮储存。
4. 复苏验证:复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法);功能验证:CD31免疫荧光染色确认内皮标志物表达。
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录);
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告);
- 复苏存活率低于85%;
- 种属鉴定结果不符。
2. 不予重发情形
- 客户未按规范储存或超时复苏;
- 使用非指定培养基或血清导致功能异常;
- 实验操作污染引发的细胞状态问题;
- 未执行标准传代流程导致的增殖停滞。
3. 备注:本产品严格遵循体外研究伦理规范,所有细胞均通过病原体检测及形态学质控。