一、细胞基本属性
- 细胞名称:鸭肝间质细胞(Duck Liver Stromal Cells)
- 细胞别称:鸭肝间充质细胞;肝基质细胞
- 种属来源:鸭(Anas platyrhynchos)
- 健康状态:健康成鸭(无肝脏疾病史,经病原体检测合格)
- 组织来源:鸭肝脏组织间质区域
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则梭形或星形,接触抑制后呈网状排列
- 细胞代数:P3 - P6(维持最佳增殖活性与分泌功能)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10%胎牛血清+1%双抗+肝细胞生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:39℃(禽类最适温度);湿度:95%
- 冻存条件:无动物源冻存液(含7% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(与细胞密度及血清批次相关)
- 供应限制:仅限体外研究,不可用于食用或转基因生物构建
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:39℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:表面消毒后直接置于恒温培养箱,4小时后首次换液
- 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
- 传代比例:1:2至1:4(初始接种密度建议1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.1%胶原酶)
- 39℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞完全脱离
- 注意事项:
- 消化后需用含血清培养基充分中和酶活性
- 传代后12小时建议补充5ng/mL bFGF增强贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清禽类专用冻存液(含7% DMSO+5%海藻糖)
- 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 4℃预冷细胞悬液10分钟
- 程序降温:-80℃冷冻盒梯度降温6小时→液氮长期储存
- 复苏验证:
- 复苏后12小时进行活率检测(AO/PI双染法≥90%)
- 功能验证:Ⅲ型胶原分泌量检测(P4代细胞应保持≥200ng/10⁶ cells/24h)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度记录异常(需提供物流温度追踪报告)
- 到货72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告)
- 细胞复苏存活率低于85%(需提供染色检测视频)
- 种属鉴定与承诺不符(COI序列比对不一致)
- 不予重发情形:
- 使用哺乳动物细胞培养基进行培养
- 未按要求进行39℃恒温培养
- 消化过程中机械损伤导致细胞碎片增多
- 未执行推荐传代密度导致细胞过早衰老
- 本产品严格遵循《禽类细胞培养技术指南》,提供STR鉴定报告及代次追踪服务