一、细胞基本属性
- 细胞名称：鸡小肠黏膜上皮细胞（Chicken Small Intestinal Mucosal Epithelial Cells）
- 细胞别称：CSI - MEC；禽类肠道上皮细胞；鸡小肠上皮细胞
- 种属来源：鸡（Gallus gallus domesticus）
- 年龄性别：健康成年鸡（性别不限，供体筛选无肠道疾病史）
- 组织来源：小肠黏膜层（采集自十二指肠至回肠段）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈紧密柱状上皮形态
- 细胞代数：P3 - P8（建议使用P4前代细胞以确保功能性蛋白表达）
- 细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Epithelial Cell Medium（含1% FBS+上皮细胞特异性生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：39℃（禽类最适温度）；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及鸟类细胞专用保护剂），-150℃液氮长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（与隐窝细胞增殖活性相关）
- 供应限制：仅限体外研究，不可用于疫苗生产或畜牧养殖领域
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：39℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面灭菌后静置培养箱30分钟
- 传代标准：细胞融合度达80% - 85%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶-EDTA（含0.1%胶原酶）
- 39℃消化30 - 60秒，立即加入含血清培养基终止
- 注意事项：
- 消化过程需密切观察细胞间紧密连接完整性
- 首次传代后12小时补充10ng/mL EGF增强贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：禽类专用无血清冻存液（含8% DMSO+海藻糖）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后细胞悬液经300×g离心5分钟
- 梯度降温程序：4℃ 20min → -20℃ 1h → -80℃ 12h → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后活率≥90%（锥虫蓝染色法）
- 功能验证：碱性磷酸酶活性检测（P3代细胞应保持≥80%酶活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温控记录异常（需提供运输温度曲线图）
- 72小时内证实微生物污染（需提交荧光染色图像）
- 细胞标志物检测CDH1表达缺失（免疫荧光法验证）
- 不予重发情形：
- 未使用配套胶原包被培养皿导致贴壁失败
- 擅自调整培养温度至哺乳动物标准（37℃）
- 消化时机械刮取造成细胞膜损伤
- 超过建议代数（P8）后出现功能退化
