一、细胞基本属性
- 细胞名称:狗肠神经胶质细胞(Canine Intestinal Glial Cells)
- 细胞别称:CIGC;肠胶质细胞;肠道神经胶质细胞
- 种属来源:犬(Canis lupus familiaris)
- 年龄性别:健康成犬(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:肠道组织神经节段(取自肠肌间神经丛)
- 生长特性:贴壁生长(依赖层粘连蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型星形或多突起形态,可形成网络状结构
- 细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:胶质细胞专用培养基(含2% FBS+GDNF及EGF生长因子)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养密度与基质包被条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加4mL预热培养基低速离心重悬
- 培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准:细胞融合度达80% - 85%(通常每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶辅助解离)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞突起回缩后终止
- 注意事项:
- 避免机械吹打过度(保护细胞突起结构完整性)
- 传代后12小时补充神经营养因子(维持胶质细胞活性)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 转入液氮
- 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(保证≥90%)
- 功能验证:GFAP免疫荧光检测(P5代细胞应维持特异性标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度失控导致细胞死亡(需提供干冰状态照片)
- 5天内证实支原体/真菌污染(需提供PCR检测报告)
- 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
- 物种鉴定与宣传不符
- 不予重发情形:
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用含高浓度血清培养基导致分化异常
- 未按规范进行细胞基质包被操作
- 超代次(P8以上)使用导致的性能下降