一、细胞基本属性
• 细胞名称:牛脂肪来源间充质干细胞(Bovine Adipose - Derived Mesenchymal Stem Cells)
• 细胞别称:Bovine ADSC;脂肪间充质干细胞;脂肪源性干细胞
• 种属来源:牛(Bos taurus)
• 年龄性别:健康成年牛(性别不限,供体无代谢性疾病史)
• 组织来源:腹部皮下脂肪组织
• 生长特性:贴壁生长(依赖基质表面接触)
• 细胞形态:长梭形或纺锤形,高核质比,单层融合后呈漩涡状排列
• 细胞代数:P3 - P8(确保多向分化潜能及基因组稳定性)
• 细胞规格:5×10⁵ cells/T75培养瓶 或1mL冻存管(无血清冻存体系)
• 培养基:Mesenchymal Stem Cell Medium(含10% FBS+双抗+成纤维生长因子)
• 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
• 冻存条件:无血清程序冻存液(含DMSO及胎牛血清替代物),-150℃液氮长期保存
• 增殖周期:约36 - 48小时(受细胞密度及传代次数影响)
• 应用限制:仅供体外研究使用,不可用于临床治疗或异种移植
二、细胞培养操作指南
• 收货处理:
• 冻存管:37℃水浴震荡溶解(≤2分钟),加入5mL完全培养基离心洗涤
• 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于CO₂培养箱平衡
• 传代标准:融合度达80% - 90%(建议每5 - 7天传代)
• 传代比例:1:3至1:4(推荐初始密度2×10³ cells/cm²)
• 消化方法:
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含酚红指示)
• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
• 关键提示:
• 终止消化时需加入等体积含血清培养基
• 首次换液应在接种后48小时进行以维持细胞贴壁
三、细胞冻存操作规范
• 冻存液组成:无血清冻存液(含8% DMSO+葡萄糖保护剂)
• 冻存密度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
• 冻存流程:
• 细胞悬液与冻存液按1:1比例混合
• 程序降温:4℃平衡30分钟→冷冻盒-80℃过夜→液氮长期存储
• 质检标准:
• 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
• 功能验证:三系分化潜能检测(成脂/成骨/软骨诱导试剂盒验证)
四、售后服务承诺
• 重发条款:
• 运输温度记录异常(需提供物流温度监测报告)
• 到货72小时内证实微生物污染(需提供荧光染色检测结果)
• 细胞增殖能力缺失(传代三次后仍无法形成单层)
• 物种鉴定与标识不符(STR位点比对报告)
• 免责声明:
• 客户未执行推荐冻存条件导致活性丧失
• 自行更改培养基配方引发表型漂移
• 超过建议代数(P8)仍继续扩增
• 未按要求进行定期支原体预防处理