大鼠脐带血间充质干细胞

大鼠原代细胞

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XM-X03795×10^5大鼠原代细胞4550


一、细胞基本属性

- 细胞名称:大鼠脐带血间充质干细胞(Rat Umbilical Cord Blood Mesenchymal Stem Cells)

- 细胞别称:rUCB - MSCs;脐带血间充质干细胞;脐血MSCs

- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)

- 年龄性别:新生大鼠(性别不限,供体健康且无遗传性疾病史)

- 组织来源:脐带血(无菌采集并经密度梯度离心分离)

- 生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白或胶原包被培养器皿)

- 细胞形态:长梭形或成纤维细胞样,单层贴壁后呈放射状排列

- 细胞代数:P3 - P8(维持多向分化潜能及基因组稳定性)

- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:低糖DMEM/F12(含10% FBS+1%双抗+成纤维细胞生长因子)

- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂),液氮长期保存

- 倍增时间:约48 - 60小时(与细胞密度及传代次数相关)

- 供应限制:仅限基础科研使用,不可用于临床治疗或药物开发


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:75%酒精擦拭外壁,静置培养箱4小时适应环境

- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐传代周期为5 - 7天)

- 传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)

- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落

- 注意事项:避免消化过度(损伤细胞表面标志物CD73/CD90);传代后48小时内避免频繁观察,减少机械扰动


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)

- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL

- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→转移至液氮

- 复苏验证:复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证:三系分化能力检测(成骨/成脂/成软骨诱导实验)


四、售后服务承诺

- 重发标准:1.物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线);2.到货72小时内证实真菌/支原体污染(需第三方检测报告);3.细胞复苏后贴壁率低于70%(需提供明场显微照片);4.流式检测CD29/CD90阳性率未达标准(阈值>95%)

- 不予重发情形:1.未使用原代冻存液直接冻存导致细胞损伤;2.自行更改培养基成分影响增殖能力;3.超过推荐代数(P8)后出现分化能力下降;4.未按规范进行诱导分化导致实验数据偏差