大鼠眼微血管内皮细胞

大鼠原代细胞

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XM-X03695×10^5大鼠原代细胞4400


一、细胞基本属性

细胞名称:大鼠眼微血管内皮细胞(Rat Ocular Microvascular Endothelial Cells)

细胞别称:ROMEC;视网膜微血管内皮细胞;眼血管内皮细胞

种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)

年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体经病原体及遗传背景筛查)

组织来源:眼球组织微血管段(经胶原酶灌注消化分离)

生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白或明胶包被培养器皿)

细胞形态:单层铺展呈扁平多边形,接触抑制后形成连续紧密连接

细胞代数:P3 - P6(维持内皮细胞特异性标志物表达及屏障功能)

细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管(含无血清冻存液)

培养基:大鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS及VEGF/bFGF生长因子)

培养条件:气相:5% CO₂恒温环境;温度:37℃;相对湿度:95%

冻存条件:程序降温专用冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存

倍增时间:约36 - 48小时(与细胞密度及生长因子补充相关)

供应限制:仅用于体外研究,不可应用于临床治疗或体内移植实验


二、细胞培养操作指南

收货处理:

·冻存管复苏:37℃水浴快速解冻后,加入预温培养基离心去冻存液

·培养瓶运输:酒精消毒表面,静置4小时后补充新鲜培养基

传代标准:融合度达80% - 90%时传代(避免形成多层生长影响屏障特性)

传代比例:1:2至1:3分瓶(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)

消化方法:

·采用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液(含1mM钙离子延缓过度消化)

·37℃消化30 - 60秒,镜下观察细胞间隙扩大后轻拍瓶壁悬浮

注意事项:

·消化终止需使用含血清培养基或胰酶抑制剂

·传代后6小时内避免移动培养器皿以保证贴壁稳定性


三、细胞冻存操作规范

冻存液配方:无蛋白冻存液(含10% DMSO及羟乙基淀粉)

细胞密度:冻存浓度1.5×10⁶ cells/mL(保证复苏后有效接种密度)

冻存步骤:

·消化后细胞经100×g离心5分钟,冻存液重悬分装至冻存管

·程序降温:4℃平衡20分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存

复苏验证:

·复苏后贴壁率≥85%(通过Calcein - AM活细胞荧光染色判定)

·功能验证:Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测(P4代细胞阳性率>98%)


四、售后服务承诺

重发标准:

1.物流温度记录仪显示超温(需提供全程温度监控曲线)

2.到货7日内经qPCR证实微生物污染(包括支原体、真菌及细菌)

3.流式细胞术检测CD31表达率低于90%

4.细胞STR分型与数据库不匹配

免责情形:

1.未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败

2.擅自更改培养基成分引发细胞形态异常

3.未使用指定浓度生长因子导致增殖停滞

4.实验操作污染未及时反馈影响责任判定


本产品严格遵循国际细胞培养标准(ISBER准则),每批次提供细胞形态学图谱、STR鉴定报告及功能检测数据,支持后续实验技术咨询。