一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠眼微血管内皮细胞(Rat Ocular Microvascular Endothelial Cells)
细胞别称:ROMEC;视网膜微血管内皮细胞;眼血管内皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体经病原体及遗传背景筛查)
组织来源:眼球组织微血管段(经胶原酶灌注消化分离)
生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白或明胶包被培养器皿)
细胞形态:单层铺展呈扁平多边形,接触抑制后形成连续紧密连接
细胞代数:P3 - P6(维持内皮细胞特异性标志物表达及屏障功能)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:大鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS及VEGF/bFGF生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂恒温环境;温度:37℃;相对湿度:95%
冻存条件:程序降温专用冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与细胞密度及生长因子补充相关)
供应限制:仅用于体外研究,不可应用于临床治疗或体内移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
·冻存管复苏:37℃水浴快速解冻后,加入预温培养基离心去冻存液
·培养瓶运输:酒精消毒表面,静置4小时后补充新鲜培养基
传代标准:融合度达80% - 90%时传代(避免形成多层生长影响屏障特性)
传代比例:1:2至1:3分瓶(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
·采用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液(含1mM钙离子延缓过度消化)
·37℃消化30 - 60秒,镜下观察细胞间隙扩大后轻拍瓶壁悬浮
注意事项:
·消化终止需使用含血清培养基或胰酶抑制剂
·传代后6小时内避免移动培养器皿以保证贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无蛋白冻存液(含10% DMSO及羟乙基淀粉)
细胞密度:冻存浓度1.5×10⁶ cells/mL(保证复苏后有效接种密度)
冻存步骤:
·消化后细胞经100×g离心5分钟,冻存液重悬分装至冻存管
·程序降温:4℃平衡20分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
·复苏后贴壁率≥85%(通过Calcein - AM活细胞荧光染色判定)
·功能验证:Ⅷ因子相关抗原免疫荧光检测(P4代细胞阳性率>98%)
四、售后服务承诺
重发标准:
1.物流温度记录仪显示超温(需提供全程温度监控曲线)
2.到货7日内经qPCR证实微生物污染(包括支原体、真菌及细菌)
3.流式细胞术检测CD31表达率低于90%
4.细胞STR分型与数据库不匹配
免责情形:
1.未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败
2.擅自更改培养基成分引发细胞形态异常
3.未使用指定浓度生长因子导致增殖停滞
4.实验操作污染未及时反馈影响责任判定
本产品严格遵循国际细胞培养标准(ISBER准则),每批次提供细胞形态学图谱、STR鉴定报告及功能检测数据,支持后续实验技术咨询。