一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠脐静脉内皮细胞(Rat Umbilical Vein Endothelial Cells)
细胞别称:RUVEC;脐静脉内皮细胞;脐静脉血管内皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无病理异常)
组织来源:脐静脉血管段
生长特性:贴壁生长(依赖胶原/纤连蛋白包被基质)
细胞形态:单层铺展呈扁平多角形,接触抑制后形成典型“铺路石样”排列
细胞代数:P3 - P8(确保功能活性与遗传稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:内皮细胞专用培养基(含5% FBS+内皮生长因子及肝素添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-196℃)
倍增时间:约36 - 48小时(与传代密度及基质包被相关)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或药物开发。
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心后重悬于预热培养基,接种至包被培养器皿。
- 培养瓶:酒精消毒表面后直接置于37℃培养箱平衡1小时。
传代标准:融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)。
传代比例:1:2至1:4(建议接种密度3×10³ cells/cm²)。
消化方法:
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液(含0.02% EDTA)。
- 37℃消化1 - 1.5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
注意事项:
- 消化全程需轻柔吹打,避免机械损伤。
- 首次换液建议在传代后6 - 8小时,以去除细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90%培养基)。
细胞密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL(离心后重悬)。
冻存步骤:
- 细胞悬液分装至冻存管,标记批次及日期。
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 转移至液氮。
复苏验证:
- 存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:CD31免疫荧光染色确认内皮特性,Ⅷ因子活性检测。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常(需提供物流温度记录证明)。
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告)。
3. 细胞复苏后存活率低于85%。
4. 物种鉴定结果与描述不符(需提供STR检测结果)。
不予重发情形:
1. 未按规范进行基质包被导致细胞贴壁失败。
2. 使用非推荐消化液或过度消化引发细胞损伤。
3. 冻存管保存温度高于-80℃超过48小时。
4. 未在细胞对数生长期内进行实验操作。