一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠视网膜小胶质细胞（Rat Retinal Microglia）
- 细胞别称：视网膜小胶质细胞；视网膜驻留免疫细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：视网膜神经组织层
- 生长特性：贴壁生长（需特定基质涂层支持）
- 细胞形态：静息态呈分支状，激活后转为阿米巴样
- 细胞代数：P3 - P8（经CD11b/c及Iba1免疫荧光验证功能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Microglia Culture Medium（含1% FBS+神经营养因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及神经保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（与炎症刺激状态相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预冷培养基轻柔混匀；培养瓶：75%酒精消毒后静置培养箱4小时适应微环境
- 传代标准：细胞融合度达80% - 85%（建议每5 - 7天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：使用0.25% Trypsin - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察胞体回缩后轻柔吹打终止
- 注意事项：避免机械力损伤（维持细胞表面趋化因子受体完整性）；传代后12小时补充20ng/mL M - CSF维持细胞活性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清神经细胞冻存液（含8% DMSO及抗氧化剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心后重悬细胞于冻存液，分装至冻存管；程序降温：4℃ 30min → -20℃ 4h → -80℃ 24h → 液氮储存
- 复苏验证：复苏后48小时检测CD68表达（流式细胞术纯度≥90%）；功能验证：LPS刺激后TNF - α分泌量检测（P5代细胞应答正常）
四、售后服务承诺
- 重发标准：1.运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度曲线）；2.7天内证实真菌/支原体污染（需提供荧光染色证据）；3.细胞吞噬功能检测未达基准值（使用荧光微球验证）；4.物种特异性标记物鉴定不符
- 不予重发情形：1.解冻后未按时更换激活培养基；2.擅自使用PMA等强刺激剂导致细胞过度激活；3.未按协议进行定期TLR信号通路检测；4.超过推荐代次（P8）仍继续实验
