一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞（Rat Placental Chorionic Trophoblast Cells）
- 细胞别称：RPTCT细胞；胎盘滋养层细胞；绒毛膜上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别可指定，供体经筛选无生殖系统疾病史）
- 组织来源：胎盘绒毛膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被表面）
- 细胞形态：铺路石样单层排列，接触抑制后呈现不规则多角形
- 细胞代数：P3 - P6（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.2mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS+EGF、hCG及孕激素添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及细胞膜稳定剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约36 - 48小时（受激素浓度影响显著）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预温培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁后静置培养箱4小时再观察贴壁情况
- 传代标准：融合度达80% - 85%（建议每48小时观察一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - 胶原酶混合消化液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔拍打促使细胞脱落
- 注意事项：
- 添加孕激素可增强细胞贴壁能力
- 传代后需静置12小时再更换培养基
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含胎牛血清替代物及抗氧化剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，缓慢滴加冻存液混匀
- 程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃ 12h → 液氮储存
- 复苏验证：
- 复苏后48小时检测β - hCG分泌量（应≥50mIU/mL）
- 功能验证：侵袭实验（Matrigel穿透率需符合批次标准）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常（需提供温度追踪数据）
- 72小时内证实微生物污染（需提供染色检测结果）
- 细胞贴壁率低于80%（需提供接种后24小时显微图像）
- 激素响应功能缺失（需提供ELISA检测数据）
- 不予重发情形：
- 使用非配套激素添加剂导致功能异常
- 未按推荐胶原包被培养器皿
- 解冻后延迟离心超过15分钟
- 未定期检测细胞分泌功能即开展实验
