一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠羊膜间充质干细胞(Rat Amniotic Mesenchymal Stem Cells)
细胞别称:rAMSC;羊膜间充质干细胞;羊膜干细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康妊娠期大鼠(胎鼠羊膜组织来源)
组织来源:妊娠期大鼠羊膜组织
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质贴附)
细胞形态:长梭形或成纤维样,单层贴壁后呈漩涡状排列
细胞代数:P3 - P8(维持干细胞特性及分化潜能)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:间充质干细胞专用培养基(含10% FBS+成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 60小时(依赖传代密度与培养条件)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
· 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
· 培养瓶:酒精消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
· 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
· 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
· 消化后轻柔吹打避免机械损伤
· 首次换液需在贴壁后24小时内完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20%胎牛血清)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
· 离心收集细胞,冻存液重悬后分装至冻存管
· 程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:
· 复苏后存活率≥85%(台盼蓝染色法)
· 功能验证:成骨/成脂诱导分化实验(P5代细胞需保持多向分化能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 复苏存活率低于85%且操作合规
4. 流式检测表面标记物(CD90/CD73阳性率<95%)
不予重发情形:
1. 未按规范进行梯度离心去除冻存液
2. 使用非推荐培养基或血清批次
3. 细胞传代超过P10代次后功能异常
4. 未定期检测支原体导致实验污染