一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠胎盘间充质干细胞(Rat Placental Mesenchymal Stem Cells)
- 细胞别称:rPMSC;胎盘间充质干细胞;胎盘源性干细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 供体信息:健康孕鼠(经病原体及遗传背景筛查)
- 组织来源:胎盘组织(绒毛膜或脐带附着区)
- 生长特性:贴壁生长(依赖基质涂层支持)
- 细胞形态:长梭形或成纤维细胞样,单层均匀分布
- 细胞代数:P3 - P8(维持干细胞多向分化潜能及基因组稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:Mesenchymal Stem Cell Medium(含10% FBS+成纤维生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(与传代密度及培养基活性相关)
- 供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含酚红指示剂)。
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应。
- 注意事项:
- 避免过度传代(P8后可能丧失分化能力)。
- 首次换液需在贴壁后24小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后24小时存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:成骨/成脂诱导分化实验(P5代细胞应具备多向分化潜能)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 7日内证实支原体或细菌污染(需第三方检测报告)。
- 细胞复苏存活率低于90%(按规范操作验证)。
- 流式检测CD90/CD44阳性率未达标准(≥95%)。
- 不予重发情形:
- 收货后超72小时未启动复苏流程。
- 使用非指定培养基或未添加必需生长因子。
- 实验操作导致细胞分化潜能丧失。
- 未按规范进行细胞鉴定直接用于实验。
(注:所有操作需符合实验室生物安全规范,最终解释权归供方所有。)