一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠眼外肌成纤维细胞（Rat Extraocular Muscle Fibroblasts）
- 细胞别称：REF；眼外肌成纤维细胞；眼眶成纤维细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：眼外肌组织（经解剖分离及胶原酶消化法提取）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质涂层支持）
- 细胞形态：长梭形或不规则三角形，融合后呈束状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12培养基（含10% FBS+成纤维细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依据培养密度及血清批次差异）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（无Ca²⁺/Mg²⁺）
- 37℃消化1 - 2分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项：
- 避免消化超时（防止细胞外基质蛋白降解）
- 首次换液需在传代后12小时内完成
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心去除旧培养基，重悬细胞于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟→ -20℃ 1小时→ -80℃ 12小时→液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持基质合成活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温控异常导致细胞失活（需提供运输温度记录证明）
- 72小时内证实微生物污染（需提供污染检测报告）
- 复苏存活率低于90%（经第三方检测机构复核）
- 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 客户超时复苏（超过收货后48小时）
- 自行更换培养基导致细胞功能异常
- 不当冻存操作（如直接置于-20℃长期保存）
- 未按规范进行细胞形态学鉴定
