一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠鼻腔粘膜上皮细胞（Rat Nasal Mucosal Epithelial Cells）
细胞别称：RNMEC；鼻腔上皮细胞；鼻粘膜上皮细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
组织来源：鼻腔粘膜组织
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：典型“铺路石样”单层，融合后呈紧密排列的多边形
细胞代数：P3 - P6（维持上皮细胞极性及屏障功能稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
培养基：Epithelial Cell Medium（含2% FBS+表皮生长因子添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含细胞特异性保护剂及8% DMSO），-150℃以下长期保存
倍增时间：约48 - 60小时（依赖细胞密度及生长因子浓度）
供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴解冻后，立即转移至含5mL预热培养基的离心管，1000rpm离心3分钟，弃冻存液后重悬接种
培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱30分钟平衡后观察贴壁状态
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代维持高活力）
传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）
37℃消化3 - 5分钟，显微镜下观察到细胞间隙增大后立即终止
注意事项：
消化全程避免剧烈吹打（保护细胞间紧密连接结构）
首次换液需添加1×抗生素 - 抗真菌剂（建议使用后24小时内撤除）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO+10%海藻糖）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
细胞消化后离心去上清，轻柔重悬于预冷冻存液
程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃专用冻存盒过夜→液氮长期保存
复苏验证：
复苏后12小时进行活率检测（台盼蓝拒染率≥90%）
功能验证：细胞角蛋白免疫荧光染色（P3代细胞应保持典型上皮标志物表达）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温控异常导致细胞失活（需提供运输温度记录凭证）
2. 到货72小时内经PCR证实微生物污染
3. 复苏存活率低于承诺标准（需提供台盼蓝染色视频记录）
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形：
1. 客户未按推荐条件进行原代培养扩增
2. 使用非指定消化酶导致细胞单层完整性破坏
3. 未执行梯度降温直接浸入液氮
4. 超过推荐代数（P6）后出现功能异常
