一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠巩膜成纤维细胞（Rat Scleral Fibroblasts）
细胞别称：巩膜成纤维细胞；巩膜基质细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年鼠（性别不限，无眼部疾病史）
组织来源：巩膜组织经胶原酶消化分离
生长特性：贴壁生长（需纤维连接蛋白包被培养器皿）
细胞形态：长梭形或星形，细胞质伸展明显
细胞代数：P3 - P6（推荐使用代数以确保功能稳定性）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基：DMEM/F12基础培养基（含10% FBS+2mM L -谷氨酰胺+1%双抗）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含7.5% DMSO及糖原保护剂），液氮长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（与传代密度及血清批次相关）
供应限制：仅用于体外研究，不可应用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理：
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬接种
培养瓶：酒精消毒外壁，静置30分钟后观察贴壁状态
传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例：1:2至1:3（初始接种密度不低于3×10³ cells/cm²）
消化方法：
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
首次传代建议保留原代培养基过渡适应
避免频繁观察导致温湿度波动影响贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含7.5% DMSO+10%蔗糖）
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
消化离心后缓慢逐滴加入预冷冻存液
程序降温：4℃平衡30分钟→ - 80℃过夜→液氮储存
复苏验证：
存活率≥85%（台盼蓝染色法）
功能验证：Ⅰ型胶原分泌检测（P3代细胞应保持分泌功能）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输超温导致细胞团块溶解（需提供温度记录）
2. 到货48小时内证实微生物污染（需提交电镜扫描图）
3. 细胞复苏后贴壁率低于70%
4. 物种鉴定结果与大鼠源性不符
不予重发情形：
1. 使用胎牛血清浓度超过15%导致分化
2. 未按规范进行胶原酶辅助消化
3. 培养环境CO₂浓度超过7%
4. 自行改造培养基成分未做对照实验
