一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠牙龈上皮细胞(Rat Gingival Epithelial Cells)
细胞别称:RGE;牙龈上皮细胞;口腔上皮细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
组织来源:牙龈组织(取自牙周健康区域)
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及钙黏蛋白介导的黏附)
细胞形态:典型多角形单层,接触抑制后呈紧密镶嵌排列
细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数以保证屏障功能与增殖活性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Epithelial Cell Medium(含2% FBS+表皮生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后,静置培养箱1小时再观察贴壁
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下见细胞间隙扩大后立即终止
注意事项:
- 消化全程轻摇培养瓶确保均匀作用
- 传代后12小时更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 消化后离心去上清,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 20min → -80℃ 4h → 转入液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:划痕实验检测迁移能力(P4代细胞应保持活跃迁移特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 收到后48小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
3. 复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色照片)
4. 种属鉴定结果与描述不符
不予重发情形:
1. 未按规范预温培养基直接解冻细胞
2. 使用非上皮细胞专用培养基培养
3. 未及时更换培养基导致细胞老化
4. 未进行无菌操作引发交叉污染
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,建议使用胶原包被培养器皿以增强细胞贴附)