一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠结膜囊成纤维细胞
- 细胞别称:结膜成纤维细胞;结膜基质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
- 组织来源:结膜囊组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,贴壁后呈不规则三角形
- 细胞代数:P3 - P8(维持功能稳定性与增殖活性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12(含10% FBS+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(依赖血清浓度与接种密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体移植
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱2小时恢复
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
- 注意事项:避免消化过度(损伤细胞膜完整性),传代后12小时更换培养基以去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及40%基础培养基)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后缓慢加入预冷冻存液,梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色法≥90%),功能验证:Ⅰ型胶原分泌检测(P5代细胞应保持分泌活性)
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 1.运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)
- 2.3天内证实微生物污染(需提供污染检测证据)
- 3.细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
- 4.种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形:
- 1.客户未按规范进行细胞复苏(如直接室温解冻)
- 2.使用非推荐培养基或添加未经验证生长因子
- 3.未定期检测支原体导致实验数据异常
- 4.细胞培养超过推荐代数仍继续使用