一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠巩膜上皮细胞（Rat Scleral Epithelial Cells）
- 细胞别称：RSEO；巩膜上皮细胞；眼表上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：巩膜组织上皮层
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质及基底膜成分）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈规则多角形
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性及遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：上皮细胞专用培养基（含10% FBS+表皮生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（与培养密度及基质条件相关）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床治疗或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱内2小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（常规每3 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议初始接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
- 注意事项：
- 避免剧烈吹打（保护细胞间紧密连接结构）
- 传代后12小时内更换新鲜培养基以清除酶残留
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及低温保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 30min → -20℃ 1.5h → -80℃过夜 → 液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）
- 功能验证：角蛋白免疫荧光染色（P4代细胞应表达特异性上皮标志物）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录证明）
- 2. 到货72小时内检测出微生物污染（需提交污染检测报告）
- 3. 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色定量结果）
- 4. 物种鉴定与标识不符（需提供STR比对数据）
- 不予重发情形：
- 1. 客户未按协议在48小时内启动复苏流程
- 2. 使用非指定培养基导致细胞形态异常
- 3. 自行改良冻存方法造成细胞损伤
- 4. 未执行污染筛查直接进行共培养实验
