一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠角膜内皮细胞（Rat Corneal Endothelial Cells）
- 细胞别称：RCEC；角膜内皮细胞；角膜内皮细胞系
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别根据供体批次标注）
- 组织来源：角膜组织内皮层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原基质或明胶包被）
- 细胞形态：单层扁平铺展，融合后呈现规则六边形镶嵌结构
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性及低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：专用角膜内皮细胞培养基（含5% FBS及内皮细胞生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约60 - 72小时（依赖培养密度及基质包被条件）
- 供应限制：仅限科学研究，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱4小时恢复代谢
- 传代标准：细胞融合度达90% - 95%（建议每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁至细胞脱落立即终止
- 注意事项：
- 避免机械损伤（角膜内皮细胞连接结构敏感）
- 更换培养基时预温至37℃，防止温度应激
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：推荐冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时存活率≥90%（台盼蓝染色检测）
- 功能验证：钠钾泵活性检测（P5代细胞应维持离子转运功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供检测报告）
- 复苏后存活率低于承诺值（需提供染色图像）
- 种属鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 未按操作指南进行复苏或传代
- 使用非指定培养基导致功能异常
- 细胞冻存后未及时转移至液氮
- 实验操作污染导致细胞状态受损
（以上内容依据标准操作流程制定，具体参数可能因批次微调，以随货说明书为准。）
