一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠鼓膜上皮干细胞（Rat Tympanic Membrane Epithelial Stem Cells）
细胞别称：RTMESC；鼓膜上皮前体细胞；耳膜上皮干细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无耳部疾病史）
组织来源：鼓膜上皮层组织
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：单层铺展呈多边形，高核质比，边缘清晰
细胞代数：P3 - P6（维持干性标记物表达及增殖潜能）
细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：上皮干细胞专用培养基（含1% FBS+表皮生长因子+肝素添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约60 - 72小时（与传代密度及生长因子补充相关）
供应限制：仅限基础研究使用，不可用于临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，加入3mL预温培养基离心洗涤
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准：细胞融合度达80% - 85%（避免过度融合影响干性维持）
传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.02%胶原酶IV消化液
- 37℃作用3 - 5分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项：
- 消化终止后需离心去除酶残留
- 传代后48小时内避免频繁观察，减少环境扰动
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO+10%蔗糖）
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ cells/mL（保证复苏后高存活率）
冻存步骤：
- 消化后细胞经离心重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期储存
复苏验证：
- 复苏后12小时检测活率（≥90%为合格）
- 干性验证：免疫荧光检测P63+及CK14+标志物表达
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常（需提供物流温度监控截图）
2. 到货72小时内证实真菌/支原体污染（需提供电镜或PCR报告）
3. 细胞活率低于85%（台盼蓝染色复检确认）
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形：
1. 未按推荐流程进行预包被处理导致贴壁失败
2. 擅自更改培养基成分引发细胞分化
3. 超低温保存设备不达标导致的冻存管破裂
4. 收货后未及时处理且未按要求记录观察数据
（注：所有操作需在生物安全二级实验室环境下进行，建议定期进行STR鉴定及分化潜能检测。）
