一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠口腔黏膜上皮细胞（Rat Oral Mucosal Epithelial Cells）
- 细胞别称：ROME细胞；口腔上皮细胞；颊黏膜上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无口腔疾病史）
- 组织来源：口腔黏膜上皮组织（颊部或舌下区无菌分离）
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养表面）
- 细胞形态：扁平多角形单层排列，细胞间桥粒结构明显
- 细胞代数：P3 - P8（确保上皮屏障功能与增殖活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Epithelial Cell Medium（含5% FBS+上皮细胞特异性生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及低温保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 60小时（受传代密度与培养基活性影响）
- 供应限制：仅限科研用途，禁止临床治疗或商品化用途
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预温培养基轻柔混悬。
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项：
- 避免机械刮取损伤基底膜完整性。
- 首次换液需在接种后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化后离心去上清，轻柔重悬于冻存液。
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后12小时细胞贴壁率≥85%。
- 功能验证：角蛋白19免疫荧光染色（P4代细胞应保持典型上皮标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）。
- 48小时内经qPCR证实支原体污染。
- 细胞存活率低于90%（台盼蓝染色法复核）。
- 种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形：
- 未在24小时内完成细胞复苏操作。
- 自行修改培养基配方导致功能异常。
- 反复冻融超过2次造成细胞损伤。
- 未按生物安全规范处理废弃培养物。
