一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠牙周膜干细胞(Rat Periodontal Ligament Stem Cells)
细胞别称:RPDLSC;牙周膜间充质干细胞;牙周膜干细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
组织来源:牙周膜组织
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形成纤维样,单层贴壁后呈漩涡状排列
细胞代数:P3 - P8(确保干性维持及多向分化潜能)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:间充质干细胞专用培养基(含10% FBS +成纤维生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约48 - 72小时(依细胞密度及培养条件波动)
供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
避免反复吹打(防止机械损伤细胞膜)
首次换液需保留50%原培养基以维持细胞黏附
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心后缓慢加入预冷冻存液重悬
程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃ 12小时→液氮长期储存
复苏验证:
复苏后48小时进行ALP活性检测(评估干性维持)
分化验证:成骨诱导14天后茜素红染色阳性(P5代细胞应保持分化能力)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
2. 到货5日内经PCR证实支原体污染
3. 复苏存活率低于85%(台盼蓝染色法)
4. 细胞表面标志物CD90/CD105阳性率未达95%
不予重发情形:
1. 收货后未按规范进行胶原包被培养
2. 擅自改用非间充质干细胞专用培养基
3. 诱导分化操作不当导致细胞功能丧失
4. 未在P8代以内完成实验而导致的细胞老化问题