一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠牙周膜成纤维细胞(Rat Periodontal Ligament Fibroblasts)
细胞别称:RPLF;牙周膜细胞;牙周成纤维细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无口腔疾病史)
组织来源:牙周膜组织(健康磨牙区牙周膜分离)
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:典型长梭形或多角形,呈放射状排列
细胞代数:P3 - P8(保证功能稳定性与低传代变异风险)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+碱性成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂), -150℃以下长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(依赖培养密度与血清批次)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:终止消化后需轻柔吹打避免机械损伤;传代后6小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及葡萄糖缓冲体系)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤:离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀;程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后48小时内检测细胞贴壁率(标准≥85%);功能验证:Ⅰ型胶原分泌检测(P5代细胞应维持基质合成活性)
四、售后服务承诺
重发标准:1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供温度监控截图);2. 到货7日内证实真菌/细菌污染(需提供污染检测影像);3. 台盼蓝染色显示存活率低于90%;4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形:1. 解冻后未及时接种(超过说明书规定时限);2. 自行更换培养基导致细胞功能异常;3. 未执行推荐传代流程引发老化现象;4. 未进行标准复苏操作导致细胞损伤