一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠脉络膜成纤维细胞（Rat Choroidal Fibroblasts）
细胞别称：RCF；脉络膜基质细胞；脉络膜成纤维母细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，经病理学筛选无眼部疾病）
组织来源：脉络膜组织（经显微分离获取）
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：长梭形或星形，具典型成纤维细胞伪足结构
细胞代数：P3 - P8（推荐使用P4 - P6代进行功能实验）
细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+2mM L-谷氨酰胺）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（与培养基批次及接种密度相关）
供应限制：仅供体外研究使用，不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后离心去冻存液，重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒表面后静置培养箱4小时再换液
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项：
- 首次传代前需离心去除原代分离残留杂质
- 维持培养基pH稳定（颜色偏橙时需及时换液）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+40% FBS）
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 消化后离心收集细胞，轻柔混悬于冻存液
- 梯度降温程序：室温→4℃ 1h→ - 80℃ 24h→液氮储存
复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌量检测（ELISA法）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 7天内确认真菌污染（需提供镜检图像）
3. 细胞存活率低于80%（台盼蓝染色法）
4. 种属鉴定结果与大鼠基因组不符
不予重发情形：
1. 未按规范进行胶原包被导致细胞贴壁失败
2. 使用含生长因子的特殊培养基未提前报备
3. 超过推荐代数仍要求功能一致性保证
4. 未执行建议的支原体预防处理流程
（注：所有操作需符合Ⅱ级生物安全实验室规范，细胞特性可能因个体差异存在批次间波动）
