一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠结膜上皮细胞（Rat Conjunctival Epithelial Cells）
- 细胞别称：RCEpiC；结膜上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：结膜组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：典型多边形或扁平铺路石样单层，接触抑制后边界清晰
- 细胞代数：P3 - P8（推荐使用代数以保证功能稳定性和增殖活性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Epithelial Cell Medium（含5% FBS+表皮生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养密度及生长因子浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，离心去除冻存液，重悬于预热培养基接种
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡后换液
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含钙镁离子缓冲液）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞间隙扩大后轻柔拍打终止
- 注意事项：
- 消化时避免剧烈吹打（防止微绒毛结构损伤）
- 首次换液需在传代后12小时内完成，去除碎片及死细胞
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+20%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后缓慢滴加冻存液混匀
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（≥90%为合格）
- 功能验证：角蛋白免疫荧光染色（P5代细胞应保持上皮特异性标记物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流全程温度记录异常导致细胞失活（需提供运输温度曲线）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 复苏存活率低于90%（经双方复测确认）
- 物种鉴定结果与描述不符
- 不予重发情形：
- 未按说明书要求进行预包被处理导致贴壁失败
- 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子
- 细胞解冻后保存于-80℃超过7天再复苏
- 实验操作污染导致细胞状态异常
