一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠晶状体上皮细胞（Rat Lens Epithelial Cells）
- 细胞别称：RLE细胞；晶状体上皮细胞；晶状体前囊上皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无眼部疾病史）
- 组织来源：晶状体前囊膜或晶状体上皮层
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展，呈多边形或梭形，接触抑制后形成紧密排列
- 细胞代数：P3 - P5（确保功能稳定性与低传代变异风险）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12基础培养基（含5% FBS + 10 ng/mL EGF + 1% ITS添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含8% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：约72 - 96小时（受培养密度及基质包被影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入3mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化30 - 60秒，镜下观察细胞边缘收缩后立即终止
- 注意事项
- 避免消化过度（防止细胞膜完整性受损）
- 首次换液需在传代后12小时内，去除死细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液；程序降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）
- 功能验证：α - 晶状体蛋白免疫荧光染色（P3代细胞应维持上皮标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录证明）
- 收到后48小时内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测图像）
- 复苏存活率低于85%（台盼蓝染色法复测确认）
- 细胞标志物表达与描述不符（需提供Western Blot结果）
- 不予重发情形
- 未按说明书要求预包被培养器皿导致贴壁失败
- 使用非推荐培养基或添加剂引发细胞分化
- 未及时换液导致培养基酸化损伤细胞
- 自行扩增后未进行支原体检测即开展后续实验
