一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠角膜基质细胞（Rat Corneal Stromal Cells）
细胞别称：RCSC；角膜成纤维细胞；角膜间充质细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无眼部病变史）
组织来源：角膜基质层组织
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：典型长梭形或星形，单层培养时呈放射状排列
细胞代数：P3 - P6（维持基质细胞表型与分泌功能）
细胞规格：5×10⁴ cells/T25培养瓶 或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM/F12（含10% FBS+碱性成纤维细胞生长因子）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及海藻糖保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约72 - 96小时（依赖细胞密度与生长因子浓度）
供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡4小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每周传代1 - 2次）
传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，观察到细胞间隙增大时终止
注意事项：
- 传代前需去除角膜上皮细胞污染（通过差异消化法）
- 培养中需定期检测胶原分泌能力以确认细胞功能
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及抗氧化剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 预冷离心管收集细胞，轻柔混悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 4h → -80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞贴壁率（应≥85%）
- 功能验证：Ⅰ型胶原免疫荧光染色（P4代细胞应保持分泌活性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 物流温度记录显示超温（需提供运输温度曲线）
2. 到货72小时内证实真菌污染（需提供革兰氏染色证据）
3. 细胞贴壁率低于80%（需提供相差显微镜图像）
4. 种属鉴定与标识不符
不予重发情形：
1. 解冻后未立即离心去除冻存保护剂
2. 擅自使用高浓度血清培养基导致分化
3. 未按规范进行胶原酶消化引发细胞团块
4. 超过建议代数仍进行实验导致功能异常
