一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠角膜上皮细胞(Rat Corneal Epithelial Cells)
细胞别称
RCEC;角膜上皮细胞;眼表上皮细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无眼部疾病史)
组织来源
角膜上皮层
生长特性
贴壁生长(需基质蛋白包被培养器皿)
细胞形态
紧密排列的多角形或铺路石样单层
细胞代数
P2 - P6(推荐使用代数,确保功能稳定性)
细胞规格
5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
Epithelial Cell Medium(含1% FBS+角膜上皮特异性生长因子)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存(-196℃)
倍增时间
约48 - 72小时(与培养基更新频率及接种密度相关)
供应限制
仅限科学研究,不可用于临床或活体移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀离心。
- 培养瓶:酒精擦拭外表面,静置于培养箱1小时恢复微环境。
传代标准
融合度达80% - 90%时传代(建议每3 - 5天操作一次)。
传代比例
1:2至1:3(推荐初始密度4×10³ cells/cm²)。
消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含钙镁离子缓冲液)。
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察边缘卷曲后立即终止。
注意事项
- 避免机械刮取(保护细胞间紧密连接结构)。
- 首次换液需在传代后12小时内完成。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。
细胞密度
推荐冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃ 12小时 → 液氮长期储存。
复苏验证
- 复苏存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:细胞角蛋白19免疫荧光染色(P3代需呈现典型上皮标志物表达)。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
2. 到货3日内证实微生物污染(需提供污染检测结果)。
3. 细胞复苏存活率低于85%。
4. 物种鉴定与标识不符(STR检测报告为证)。
不予重发情形
1. 未按规范进行预包被处理导致贴壁失败。
2. 使用非指定培养基或血清浓度过高。
3. 解冻后未及时接种或二次冻存。
4. 未提供污染检测原始数据而申请售后。
(注:本产品经无菌及支原体检测合格,提供COA报告及培养建议手册。)