一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠脊髓成纤维细胞
细胞别称:脊髓成纤维细胞、脊髓间质细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别可选/混合)
组织来源:脊髓组织间质层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被表面)
细胞形态:长梭形或多角形,呈典型成纤维样放射状排列
细胞代数:P3 - P6(经严格质控确保功能稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+1%双抗+成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含5% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与传代密度及血清浓度相关)
供应限制:仅供体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲时终止
注意事项:
避免消化过度导致细胞膜损伤
首次换液需在传代后6 - 8小时完成
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含5% DMSO+40%基础培养基+55% FBS)
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
梯度降温程序:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃ 12小时→液氮储存
复苏验证:
复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)
功能验证:细胞贴壁率>85%(复苏后24小时观察)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)
2. 到货48小时内经PCR证实支原体污染
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微图像)
4. 种属鉴定结果与标识不符
不予重发情形:
1. 未按推荐方法进行细胞复苏
2. 使用非指定培养基导致细胞形态异常
3. 多次冻融操作造成细胞损伤
4. 未执行标准传代流程导致的增殖停滞