一、细胞基本属性:
- 细胞名称:大鼠三叉神经星形胶质细胞(Rat Trigeminal Astrocytes)
- 细胞别称:三叉神经胶质细胞;脑神经星形胶质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
- 组织来源:三叉神经节及周围神经组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖多聚赖氨酸包被培养器皿)
- 细胞形态:典型星形多极分支状,胞体饱满且突起清晰
- 细胞代数:P3 - P8(确保功能稳定性与标志物表达一致性)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12培养基(含10% FBS+2%星形胶质细胞专用添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞膜保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~60 - 84小时(受培养密度与生长因子浓度影响)
- 供应限制:仅限于体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南:
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱4小时适应环境
- 传代标准:细胞融合度达80% - 85%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:4(建议初始接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺平衡液),37℃消化3 - 5分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项:
- 消化终止需立即加入含血清培养基
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范:
- 冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:推荐冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液,程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 4小时 → -80℃ 12小时 → 液氮储存
- 复苏验证:
- 复苏后48小时进行GFAP免疫荧光鉴定(阳性率需≥98%)
- 功能验证:谷氨酸摄取实验(P5代细胞应保持正常转运活性)
四、售后服务承诺:
- 重发标准:
- 1.运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 2.到货7日内经PCR证实支原体污染
- 3.细胞复苏存活率低于85%(台盼蓝染色复检确认)
- 4.GFAP免疫荧光鉴定不符合质量标准
- 不予重发情形:
- 1.收到细胞后未按规范进行原代培养直接冻存
- 2.使用非推荐包被材料导致细胞贴壁失败
- 3.自行修改培养基配方引发的功能异常
- 4.未在生物安全柜内操作造成的交叉污染