一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠背根神经节细胞（Rat Dorsal Root Ganglion Cells）
- 细胞别称：DRG神经元；脊髓感觉神经元；背根节神经元
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源：背根神经节组织（脊髓两侧神经节段）
- 生长特性：贴壁生长（需包被基质胶或层粘连蛋白）
- 细胞形态：典型多极神经元样，胞体呈球形，突起细长分支
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P3代，建议使用前2代以保持功能特性）
- 细胞规格：5×10^4 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：神经元专用培养基（含2% B27添加剂+50ng/mL NGF）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及神经保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：终末分化细胞，无增殖能力（需定期补充新鲜神经元）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热的神经元培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭外壁，静置培养箱1小时平衡后换液
- 培养维护：
- 每2 - 3天半量换液，避免机械扰动损伤神经元突触
- 建议添加神经生长因子（NGF）维持存活与功能
- 传代提示：
- 原代细胞不建议常规传代，如需扩增建议使用低浓度胰酶（0.025%）短时消化
- 注意事项：
- 避免频繁观察或振动培养箱（影响神经元突触连接）
- 培养皿需预包被多聚赖氨酸或层粘连蛋白以增强贴附
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清神经元冻存液（含10% DMSO+20% FBS+神经营养因子）
- 冻存密度：建议浓度：1×10^6 cells/mL（高密度冻存提升复苏存活率）
- 冻存步骤：
- 轻柔消化收集细胞，离心后重悬于冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：免疫荧光染色β - III tubulin阳性率≥95%，钙离子成像检测电生理活性
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控截图）
- 到货3日内证实支原体污染（需提供第三方检测报告）
- 神经元特异性标记物（如NeuN）表达阴性
- 细胞存活率低于85%（需提供复苏后24小时检测结果）
- 不予重发情形：
- 未按规范预包被培养器皿导致细胞贴壁失败
- 使用含血清培养基导致胶质细胞污染
- 未定期补充生长因子引发神经元凋亡
- 超过推荐代次（P3）后功能异常
