一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠背根神经节神经元细胞(Rat Dorsal Root Ganglion Neuronal Cells)
- 细胞别称:DRG神经元细胞;背根神经节神经元细胞;感觉神经元细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:新生SD大鼠(性别不限,供体无神经损伤及遗传疾病史)
- 组织来源:背根神经节组织(脊髓背根神经节段)
- 生长特性:贴壁生长(需基质包被培养器皿)
- 细胞形态:典型多极神经元样,胞体呈球形,突触延伸明显
- 细胞代数:原代细胞(P0 - P3代,建议使用低传代次以保持功能特性)
- 细胞规格:5×10⁴ cells/T25包被培养瓶或0.5mL冻存管(含专用神经细胞冻存液)
- 培养基:神经细胞专用培养基(含2% B27添加剂+50ng/mL NGF)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清神经细胞冻存液(含DMSO及神经保护剂),-150℃以下长期保存
- 功能特性:表达神经元标志物β - III tubulin,具备电压门控离子通道活性
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预包被培养瓶
- 培养瓶:保持直立运输,静置30分钟后转移至培养箱
- 传代标准:原代细胞不建议传代(若需分离,建议接种后7天内完成实验)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含10% FBS中和液)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察突触回缩后终止
- 注意事项
- 全程避免剧烈震荡(防止突触断裂)
- 培养液需每48小时半量更换(维持神经营养因子浓度)
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清神经细胞冻存液(含5% DMSO+10%蔗糖)
- 冻存密度:1×10⁶ cells/mL(高密度冻存可提升复苏存活率)
- 冻存步骤
- 离心后轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测神经元特异性标记物(β - III tubulin阳性率≥85%)
- 功能验证:钙离子成像检测刺激响应性
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 干冰运输过程异常导致细胞团块溶解(需提供温度记录证明)
- 到货48小时内经PCR证实支原体污染
- 神经元标志物表达率低于80%(需提供免疫荧光检测原始数据)
- 不予重发情形
- 培养超过7天后提出异常反馈
- 未使用基质包被培养器皿导致细胞贴壁失败
- 自行尝试传代导致细胞功能丧失
- 未按规范进行培养基更换引发细胞退化