一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠脑血管成纤维细胞（Rat Cerebrovascular Fibroblasts）
- 细胞别称：RCvF；脑血管成纤维细胞；脑膜成纤维细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑组织微血管周围区域
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或纺锤状，单层排列呈放射状或网状
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性与遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Fibroblast Growth Medium（含10% FBS +成纤维细胞特异性添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），- 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养密度与血清浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱2小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）。
- 37℃消化1 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜损伤）。
- 首次传代后需补充5ng/mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶-2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞，轻柔重悬于预冷冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30min → - 20℃ 1h → - 80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时内检测细胞贴壁率（≥85%）。
- 功能验证：胶原分泌能力检测（P5代细胞应维持基质合成功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）。
- 5天内证实微生物污染（需提供检测报告）。
- 复苏后贴壁率低于80%（需提供培养图像）。
- 种属鉴定与宣传不符（STR比对结果）。
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行胶原包被直接培养。
- 使用非标准培养基导致细胞去分化。
- 未定期进行支原体污染筛查。
- 自行改良培养条件引发的功能异常。
（注：所有操作需符合生物安全规范，细胞特性可能因实验条件存在批次差异。）
