一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠神经干细胞（Rat Neural Stem Cells）
- 细胞别称：RNSCs；神经祖细胞；神经前体细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康胎鼠或新生鼠（性别不限，供体无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑组织特定区域（如海马、脑室下区或纹状体）
- 生长特性：悬浮成神经球或贴壁生长（依赖生长因子及基质条件）
- 细胞形态：悬浮培养呈球形（神经球），贴壁培养可见放射状突起
- 细胞代数：P2 - P6（维持干性及增殖分化潜能）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：神经干细胞专用培养基（无血清，含EGF、bFGF及B27添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依赖培养条件及神经球大小）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡温湿度
- 传代标准：神经球直径达100 - 150μm或贴壁细胞融合度达80% - 90%
- 传代比例：1:3至1:4（悬浮培养需机械吹散神经球，贴壁培养按密度调整）
- 消化方法
- 贴壁细胞：使用0.05% Accutase或温和胰酶，37℃消化3 - 5分钟
- 悬浮神经球：离心后直接机械分离或短暂酶解
- 注意事项
- 避免过度消化损伤细胞膜完整性
- 贴壁培养需使用多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被培养皿
- 传代后48小时内观察神经球形成或贴壁状态
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^5 - 1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：神经球形成实验或分化潜能检测（神经元/胶质细胞标志物表达）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡（需提供干冰包装证明）
- 3天内证实微生物污染（需提供检测报告）
- 细胞复苏后活力低于90%（台盼蓝染色法）
- 种属鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时（影响细胞活性）
- 使用非推荐培养基或添加剂导致干性丢失
- 未按规范进行细胞传代或冻存操作
- 未进行污染检测直接用于后续实验
