一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠脑动脉平滑肌细胞(Rat Brain Arterial Smooth Muscle Cells)
2. 细胞别称:BASMC;脑动脉SMC;脑血管平滑肌细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
5. 组织来源:脑动脉中膜层(经胶原酶分级消化分离)
6. 生长特性:贴壁生长(需包被胶原基质或纤维连接蛋白)
7. 细胞形态:典型长梭形或纺锤形,融合后呈束状平行排列
8. 细胞代数:P3 - P8代(确保收缩表型及钙离子调节功能稳定性)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含5% FBS+生长因子组合:PDGF - BB、TGF - β1)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
13. 倍增时间:~48 - 72小时(受血清浓度及机械张力影响)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床治疗或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入预热的培养基轻柔混匀后离心接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后,静置于培养箱30分钟平衡温度与气体环境
2. 传代标准:细胞融合度达90% - 95%(建议每3 - 4天传代维持收缩特性)
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶辅助解离)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即加入含血清培养基终止
5. 注意事项
- 避免机械刮取损伤细胞骨架(影响收缩功能)
- 传代后12小时更换培养基以清除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖渗透保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期存储
4. 复苏验证
- 复苏后24小时存活率≥95%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:α - 平滑肌肌动蛋白(α - SMA)免疫荧光鉴定(P5代细胞阳性率>98%)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供液氮罐温度记录证明)
- 收货7日内确认支原体/细菌污染(需提供第三方检测报告)
- 复苏后细胞贴壁率低于80%(需提交接种后24小时显微照片)
- 特异性标志物表达不符合技术文档(α - SMA或Calponin检测阴性)
2. 不予重发情形
- 客户未按规范进行胶原基质包被导致细胞脱落
- 自行使用血管内皮细胞培养基导致表型转化
- 实验过程中施加异常机械应力造成细胞损伤
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染
3. 本产品经ISO9001质量体系认证,提供STR图谱及代次追踪报告