一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠少突胶质细胞(Rat Oligodendrocytes)
- 细胞别称:ROs;中枢神经少突胶质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:新生或成年大鼠(性别不限,供体无神经系统疾病史)
- 组织来源:脑组织或脊髓白质区
- 生长特性:贴壁生长(需特定基质包被)
- 细胞形态:初期呈双极或星形,成熟后分支状突起明显
- 细胞代数:原代至P3代(推荐原代培养以保持功能特性)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:少突胶质细胞专用培养基(含2% B27、PDGF - AA、FGF - 2)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及神经细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
- 倍增时间:~96 - 120小时(原代细胞增殖较缓慢)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶:酒精消毒外壁后静置培养箱4小时,逐步更换新鲜培养基。
- 传代标准:细胞密度达70% - 80%(避免过度融合导致分化)
- 传代比例:1:1至1:2(原代细胞建议低密度传代)
- 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含Ca²⁺/Mg²⁺)。
- 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打终止反应。
- 注意事项:
- 需预包培养皿(多聚赖氨酸/层粘连蛋白)。
- 传代后48小时内避免换液,防止机械损伤。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO、20%胎牛血清替代物)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:
- 离心后重悬于冻存液,分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)。
- 功能验证:免疫荧光检测MBP或CNPase表达(P1代细胞应维持髓鞘合成潜能)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录)。
- 7天内证实支原体污染(需提供qPCR检测结果)。
- 细胞存活率低于80%(按规范复苏检测)。
- 种属鉴定与描述不符(STR分析报告)。
- 不予重发情形:
- 未使用推荐包被基质导致贴壁失败。
- 培养超过P3代后功能异常。
- 未按规范进行细胞分化诱导操作。
- 实验污染未及时反馈(超过14天)