一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠小胶质细胞（Rat Microglia）
- 细胞别称：中枢神经胶质细胞；脑组织固有免疫细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑组织（大脑皮质或脊髓分离）
- 生长特性：贴壁生长（需基质胶包被培养器皿）
- 细胞形态：静息态呈分支状突起，激活后转为阿米巴样圆形
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P3，建议使用前两代以保持功能特性）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：DMEM/F12 + 10% FBS + 1%青霉素/链霉素 + 0.2% M - CSF
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含5% DMSO及海藻糖保护剂），液氮长期保存
- 增殖特性：静息态低增殖率，LPS刺激后活化增殖能力增强
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管为37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基；贴壁培养瓶是酒精消毒后静置培养箱4小时再换液
- 传代标准：细胞密度达70% - 80%融合（原代细胞建议每周传代一次）
- 传代比例：1:1至1:2（原代细胞需保留部分条件培养基）
- 消化方法：使用0.25%胰酶 - EDTA（含0.02% EDTA），37℃消化3 - 5分钟，镜下观察突起回缩后立即终止
- 注意事项：避免频繁换液（建议每48小时半量换液）；活化实验前需静息培养72小时以上
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清神经细胞专用冻存液（含5% DMSO + 2% BSA）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：4℃预冷离心后轻柔重悬细胞；程序降温：4℃ 30分钟 → - 20℃ 1小时 → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证：存活率≥85%（AO/PI双染法检测）；功能验证：LPS刺激后TNF - α分泌量检测（P1代细胞应≥200 pg/mL）
四、售后服务承诺
- 重发标准：到货时干冰完全挥发且细胞瓶破裂（需提供开箱视频）；48小时内证实真菌污染（需提供革兰氏染色证据）；静息态细胞CD11b阳性率＜90%（流式检测报告）；核型分析显示种属交叉污染
- 不予重发情形：使用含高浓度血清（＞15%）的非常规培养基；未按推荐进行基质胶包被导致细胞悬浮；采用机械吹打法传代造成物理损伤；未进行支原体预防性处理引发污染
