一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠星形胶质细胞(Rat Astrocytes)
- 细胞别称:CNS星形胶质细胞;脑星形胶质细胞;胶质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康新生或成年大鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
- 组织来源:脑组织或脊髓组织(经特异性分离纯化)
- 生长特性:贴壁生长(依赖多聚赖氨酸或层粘连蛋白包被的培养器皿)
- 细胞形态:典型星形多突状,胞体呈辐射状伸展,接触抑制后形成网状结构
- 细胞代数:P2 - P6(确保功能活性与纯度达标)
- 细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS + 星形胶质细胞专用生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖培养密度与生长因子浓度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱4小时平衡后再换液
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用试剂:0.25%胰蛋白酶或Accutase消化液
- 操作流程:37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项
- 避免机械吹打过度(防止损伤细胞突触结构)
- 首次传代后48小时内避免换液以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液,分装至冻存管
- 梯度降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:GFAP免疫荧光鉴定(P3代细胞应维持特异性标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供全程温控记录)
- 5天内证实支原体或真菌污染(需提供检测报告)
- 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
- 标志物表达与说明书不符(需提供流式检测数据)
- 不予重发情形
- 未按推荐条件培养(如未使用包被培养皿或专用培养基)
- 解冻后静置超过24小时未接种
- 实验操作污染导致细胞状态异常
- 未提供完整污染检测报告即申请售后