一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠雪旺细胞(Rat Schwann Cells)
- 细胞别称:雪旺氏细胞;神经胶质细胞;外周神经胶质细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康新生鼠或成年鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
- 组织来源:坐骨神经或背根神经节(经胶原酶/胰酶联合消化分离)
- 生长特性:贴壁生长(需层粘连蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:典型双极或梭形,接触抑制后呈平行排列
- 细胞代数:P3 - P8(经S100免疫染色验证纯度≥95%)
- 细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:雪旺细胞专用培养基(含2% FBS、heregulin及Forskolin)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~72 - 96小时(依赖神经营养因子浓度及基质包被条件)
- 供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加3mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置培养箱4小时平衡
- 传代标准:细胞密度达80% - 85%(建议每5 - 7天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,镜下观察细胞间隙增宽后终止
- 注意事项
- 避免机械吹打过度(损伤轴突支持功能)
- 传代后48小时内避免换液以维持神经营养因子浓度
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心后重悬细胞于冻存液,分装至冻存管
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:NF - L免疫荧光染色确认髓鞘蛋白表达
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
- 7日内证实支原体污染(需提供qPCR检测结果)
- 细胞纯度低于90%(S100免疫荧光检测)
- 种属鉴定与大鼠STR数据库不匹配
- 不予重发情形
- 解冻后超72小时未贴壁即判定异常
- 使用非专用培养基导致分化或功能丧失
- 未按规范进行胶原酶辅助消化引发细胞损伤
- 未定期检测神经标志物导致实验结论偏差