一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠脊髓神经元细胞(Rat Spinal Cord Neuron Cells)
细胞别称:脊髓神经细胞;大鼠脊髓神经元;脊髓神经元
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:新生大鼠(性别不限,供体筛选无神经系统疾病史)
组织来源:脊髓组织
生长特性:贴壁生长(需多聚赖氨酸或层粘连蛋白基质包被)
细胞形态:典型神经元形态,具轴突和树突分支,形成突触网络
细胞代数:P2 - P5(维持神经元电生理特性及功能稳定性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:神经基础培养基(含2% B27添加剂+1%谷氨酰胺+20ng/mL BDNF/GDNF)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及神经元保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:原代神经元不增殖(功能细胞不可传代)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱30分钟平衡温湿度
传代标准:原代神经元不建议传代(如需处理,建议直接铺板至实验载体)
操作建议:
使用0.25% Trypsin - EDTA轻柔消化(37℃ 30 - 60秒)
机械吹打≤3次,终止后离心(100×g,5分钟)
注意事项:
避免反复传代(神经元成熟后丧失分裂能力)
培养24小时后更换培养基以去除细胞碎片
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清神经元专用冻存液(含10% DMSO+90%胎牛血清)
细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL(高密度保障突触连接)
冻存步骤:
消化后离心收集细胞,轻柔重悬于冻存液
程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时检测神经元特异性标记(β - III Tubulin阳性率≥90%)
功能验证:钙离子成像或膜片钳检测动作电位
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)
2. 到货72小时内证实细菌/真菌污染(需提供染色检测结果)
3. 神经元标记物阳性率低于80%(免疫荧光验证)
不予重发情形:
1. 未使用基质包被培养器皿导致贴壁失败
2. 解冻后静置超过48小时未换液
3. 擅自使用含血清培养基干扰神经元分化
4. 未按规范进行电生理检测即发表数据
(注:所有操作需符合生物安全规范,原代神经元建议直接用于实验,避免冻存复苏影响功能。)