一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠脑皮层神经元细胞（Rat Cerebral Cortex Neuronal Cells）
- 细胞别称：原代皮层神经元；神经元细胞；脑神经细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：新生大鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑皮层组织（分离自胚胎期或新生大鼠）
- 生长特性：贴壁生长（需多聚赖氨酸或层粘连蛋白基质包被）
- 细胞形态：典型多极形态，具有轴突与树突结构
- 细胞代数：原代细胞（P0 - P3，建议使用低代数以保证神经元活性）
- 细胞规格：5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含优化冻存液）
- 培养基：Neurobasal培养基（含2% B27添加剂、0.5 mM谷氨酰胺及神经营养因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：专用神经元冻存液（含DMSO及神经保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：终末分化细胞，无增殖能力（需定期补充营养因子）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预温培养基
- 培养瓶：酒精擦拭外壁后直接置于培养箱，静置24小时再换液
- 培养维护
- 每2 - 3天更换50%培养基（避免全换液导致渗透压骤变）
- 维持培养基中谷氨酰胺及神经营养因子的稳定浓度
- 传代提示
- 原代神经元不建议常规传代（需特定消化酶处理）
- 实验需扩增时，采用低浓度胰酶（0.025%）短时消化
- 注意事项
- 避免机械振动或频繁观察（神经元对机械刺激敏感）
- 培养环境需严格无菌，建议添加抗生素/抗真菌剂
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：神经元专用无血清冻存液（含5% DMSO、海藻糖及抗氧化剂）
- 冻存密度：推荐浓度：1×10⁶ cells/mL
- 冻存流程
- 轻柔离心收集细胞，避免损伤突触结构
- 程序降温：4℃平衡30分钟 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：免疫荧光检测神经元特异性标记物（如β-III tubulin、MAP2）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输中温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 复苏存活率低于承诺值（需提供染色结果）
- 细胞标志物鉴定与描述不符
- 不予重发情形
- 未按规范进行预包被处理导致细胞贴壁失败
- 使用非推荐培养基或添加剂（如含血清成分）
- 实验操作不当导致突触结构损伤
- 未定期补充神经营养因子引发细胞退化
