一、细胞基本属性
细胞名称
大鼠脑动脉血管内皮细胞(Rat Brain Arterial Endothelial Cells)
细胞别称
RBACEC;脑动脉内皮细胞;脑血管内皮细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无脑血管疾病史)
组织来源
脑动脉血管段
生长特性
贴壁生长(依赖细胞外基质成分)
细胞形态
典型单层铺路石样排列,接触抑制后呈扁平多角形
细胞代数
P3 - P8(保证功能稳定性与遗传一致性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基
内皮细胞专用培养基(含2% FBS+内皮细胞生长因子添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
~48 - 72小时(依赖培养密度与基质条件)
供应限制
仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻后,加入4mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱平衡2小时
传代标准
细胞融合度达85%-90%(通常每3 - 4天传代一次)
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度5×10³ cells/cm²)
消化方法
使用0.05% Trypsin - EDTA(无Ca²⁺/Mg²⁺)
37℃消化1 - 2分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
注意事项
避免消化过度(防止紧密连接蛋白降解)
传代后24小时更换新鲜培养基以去除残余酶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞膜稳定剂)
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤
离心收集细胞,轻柔重悬于预冷冻存液
梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证
复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥95%)
功能验证:血管内皮钙粘蛋白免疫荧光染色(P5代细胞应维持典型标记表达)
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供干冰包装状态证明)
2. 3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测报告)
3. 细胞复苏存活率低于90%(台盼蓝染色法)
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形
1. 客户未按规范在72小时内复苏细胞
2. 使用非指定培养基导致细胞功能异常
3. 因反复冻融导致的细胞损伤
4. 未执行推荐检测流程直接进行实验