一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠脑微血管内皮细胞（Rat Brain Microvascular Endothelial Cells）
- 细胞别称：RBMEC；脑微血管内皮细胞；脑血管内皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无神经系统疾病史）
- 组织来源：脑组织微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原或纤维连接蛋白包被）
- 细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈扁平多角形
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性和低传代变异）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：内皮细胞专用培养基（含2% FBS、VEGF及bFGF生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（与基质包被密度相关）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基；
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时。
- 传代标准：融合度达80% - 90%（推荐每3 - 4天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（无Ca²⁺/Mg²⁺）；
- 37℃消化30 - 60秒，显微镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
- 注意事项：
- 严格控制消化时间以保护紧密连接蛋白；
- 首次换液需在传代后12小时内完成，去除细胞碎片及残留酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）。
- 细胞密度：推荐冻存浓度1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液；
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟 → - 20℃ 2小时 → - 80℃过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝拒染法≥90%）；
- 屏障功能验证：通过跨内皮电阻（TEER）检测P5代细胞完整性。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）；
- 3日内确认支原体污染（需提供第三方检测报告）；
- 复苏存活率低于90%（需提供台盼蓝染色影像）；
- 细胞STR谱系与数据库不符。
- 不予重发情形：
- 收货后超72小时未进行复苏操作；
- 使用非指定培养基或未包被基质导致功能异常；
- 反复冻融或不当操作损伤细胞；
- 未按规范检测污染直接用于实验。
