一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠骨髓巨噬细胞（Rat Bone Marrow - Derived Macrophages）
- 细胞别称：BMDM；骨髓源性巨噬细胞；原代巨噬细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别可选，需提前确认）
- 组织来源：骨髓腔单核细胞经体外分化诱导
- 生长特性：贴壁生长（需特定细胞因子维持表型）
- 细胞形态：不规则多形性，活化后可见伪足伸展
- 细胞代数：原代细胞（建议传代不超过3次以保持功能）
- 细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用冻存液）
- 培养基：RPMI 1640 + 10% FBS + 20ng/mL M - CSF（维持M0表型）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖特性：分化后为终末细胞，无自主增殖能力
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基接种
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，静置培养箱1小时平衡温湿度
- 分化诱导：
- 骨髓单核细胞需经7天M - CSF诱导分化为成熟巨噬细胞
- 每3天更换含M - CSF的新鲜培养基
- 传代建议：
- 贴壁细胞轻柔刮取（避免酶消化损伤表面受体）
- 离心后按1:2比例接种于预铺胶原的培养器皿
- 注意事项：
- 分化后细胞对LPS等刺激敏感，避免高频次传代
- 培养全程需无菌操作，定期检测支原体污染
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：基础培养基+ 20% FBS + 10% DMSO
- 冻存密度：推荐浓度：1×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 轻柔收集细胞，离心后重悬于冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：吞噬荧光微球实验（P1代细胞吞噬效率应＞70%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录）
- 到货3天内证实细菌/真菌污染（需提供污染检测证据）
- 细胞贴壁率低于70%（需提供接种后24小时显微照片）
- 流式检测CD68阳性率未达90%（需提供检测报告）
- 不予重发情形：
- 未按诱导程序操作导致分化失败
- 使用非推荐细胞因子（如GM - CSF替代M - CSF）
- 复苏后培养超过5天未及时冻存
- 自行修饰细胞基因后导致功能异常
（注：以上内容基于标准操作流程，具体实验需根据研究目的优化参数。）
