一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠脾淋巴细胞（Rat Splenic Lymphocytes）
细胞别称：脾脏淋巴细胞；脾T/B淋巴细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，无免疫缺陷背景）
组织来源：脾脏组织机械分离后密度梯度离心纯化
生长特性：悬浮生长（原代培养需添加细胞因子维持活性）
细胞形态：圆形或类圆形单细胞，直径约6 - 8微米
细胞代数：原代培养（建议直接用于实验，避免长期扩增）
细胞规格：1×10⁶ cells/冻存管（含淋巴细胞专用冻存液）
培养基：RPMI 1640培养基（含10% FBS+1%双抗+50μM β - 巯基乙醇）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含7.5% DMSO及胎牛血清），液氮长期保存
增殖周期：原代细胞不建议扩增培养（建议直接功能实验）
供应限制：仅限体外研究，不可用于活体回输或疾病治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理：
• 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
• 收到后立即进行功能实验（原代细胞活性随时间递减）
培养建议：
• 维持密度1×10⁶ cells/mL，每48小时半量换液
• 激活培养可添加ConA（T细胞）或LPS（B细胞）
分离纯化：
• 磁珠分选法获取CD3+ T细胞或CD45R+ B细胞亚群
• 流式细胞术检测纯度需达90%以上
注意事项：
• 避免反复离心（易引起细胞聚集）
• 培养超过72小时需补充IL - 2等细胞因子
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：淋巴细胞专用冻存液（含7.5% DMSO+40% FBS）
细胞密度：1×10⁷ cells/mL（高浓度冻存减少冰晶损伤）
冻存步骤：
• 4℃预冷冻存液重悬细胞
• 程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃ 12h → 液氮保存
复苏验证：
• 台盼蓝染色存活率≥85%（原代细胞允许10%自然凋亡）
• 功能验证：CFSE增殖检测（刺激后应有明显分裂峰）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞团块溶解（需提供物流温度记录）
2. 72小时内证实微生物污染（需提供无菌检测报告）
3. 流式分选纯度未达合同约定阈值（附第三方检测报告）
不予重发情形：
1. 收到后未按规范立即离心去除冻存液
2. 使用含钙离子培养基导致细胞自发激活
3. 未采用推荐激活剂进行功能验证
4. 原代细胞解冻后保存超过24小时未使用
（注：所有操作需遵守Ⅱ级生物安全规范，实验废弃物需经高压灭菌处理）
